Бурьян А.А., Полуян С.М., Погосян Е.Г., Шовковая З.В.
Национальный фармацевтический университет, г. Харьков, Украина
На сегодняшний день распространение ВИЧ-инфекции во всем мире приобретает признаки эпидемии, которая, к сожалению, не обошла стороной и Украину. На данном этапе уже известны два вида возбудителя СПИД — ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Из-за длительного периода носительства реальное количество ВИЧ-инфицированных на порядок выше, чем количество официально выявленных, и хотя темпы роста заболеваемости заметно снизились, все больше возникает случаев возникновения резистентных к общепринятым средствам терапии форм вируса СПИДа.
На масштабы эпидемии ВИЧ/СПИД влияют такие факторы, как экономическая нестабильность, рост наркотизации, проституции, недостаток профилактических мероприятий. В настоящее время в Украине действует Общегосударственная программа обеспечения профилактики ВИЧ-инфекции, лечения, ухода и поддержки ВИЧ-инфицированных и больных СПИД на 2009 — 2013 годы, утвержденная Законом Украины от 19 февраля 2009 года. Обязательной составляющей комплексной медицинской помощи ВИЧ-инфицированным является антиретровирусная терапия (АРТ). Применение антиретровирусных препаратов (АРВП) в клинике ВИЧ-инфекции позволяет не только создать условия, при которых развитие СПИДа становится более или менее регулируемым хроническим процессом, но также восстановить работоспособность и социальные функции ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом.
В связи с этим постоянно расширяется ассортимент АРВП, как за счет создания новых лекарственных форм, содержащих препараты — генерики, как монокомпонентных, так и состоящих из нескольких субстанций, а также на основе оригинальных синтезированных препаратов.
АРВП обладают рядом характеристик, которые требуют особого подхода в применении. В их числе индивидуальные различия фармакокинетики, серьезные последствия неэффективности лечения, а также возникающих побочных эффектов терапии, подтвержденная зависимость между концентрацией препарата, его эффектом и токсичностью. Кроме того, эффект препарата часто зависит не столько от его дозы, сколько от концентрации в крови и тканях. Это, в свою очередь, обуславливает необходимость разработки новых и совершенствования существующих методик анализа препаратов данной группы.
Целью наших исследований является разработка методик идентификации АРВП, пригодных для проведения химико-токсикологического анализа, с помощью метода тонкослойной хроматографии.
Для проведения исследований были выбраны АРВП, наиболее широко используемые на практике для профилактики и терапии ВИЧ-инфекции и СПИДа: абакавир, диданозин, зидовудин, ламивудин, ставудин, тенофовир и эфавиренц.
Предварительные исследования по установлению чувствительности различных проявителей по отношению к выбранным для анализа АРВП на пластинках для тонкослойной хроматографии Sorbfil без развития хроматограмм показали, что наиболее чувствительными являются: облучение УФ-светом (чувствительность составила 0,1 мкг в пробе), пары йода (чувствительность составила 0,5 мкг в пробе), поэтапная обработка солями ртути (II) c последующим опрыскиванием 0,05% раствором дифенилкарбазона в хлороформе (чувствительность составила 0,5 мкг в пробе) и обработка 0,5% раствором о-толидина в ацетоне (чувствительность составила 0,5 мкг в пробе).
При этом было установлено, что использование в качестве проявителей солей ртути (II) c последующим опрыскиванием 0,05% раствором дифенилкарбазона в хлороформе и 0,5% раствора о-толидина в ацетоне при проведении хроматографических исследований позволяет за счет образования характерной окраски в дальнейшем анализе идентифицировать отдельных представителей из группы АРВП.