Стратулат Т. Г.1, Сырку Р.Ф.1, Оуату А.В.1, Бондаренко Е.В.2
1Национальный Центр Общественного Здоровья, г. Кишинев, Молдова
2Государственный Университет Медицины и Фармации им. Николая Тестемицану, Кишинев, Молдова
В последние десятилетия для изучения различных аспектов действия химических веществ на клеточные и субклеточные структуры все шире используются клетки, выращенные in vitro. Преимущество данной модели заключается в возможности изучения прямого действия химического агента на клетку вне тканевых и органных взаимодействий и регуляторного влияния нервной и эндокринной систем.
Цель — оценка влияния комбинированного воздействия низких концентраций ДДТ и ПХБ на культивированные клетки человека.
Изучено влияние низких доз ДДТ и ПХБ на перевиваемую линию клеток НЕр-2. Ростовая среда: среда Игла МЕМ (85%), эмбриональная телячья сыворотка (до 10%), стрептомицин по 100 ед./мл среды. Посевная доза клеток — 70-90 тыс. в 1 мл среды. Клетки выращивали на специально подготовленных покровных стеклах, инкубировали при температуре 37°С.
В первой серии экспериментов были определены параметры токсичности ДДТ и ПХБ для культуры НЕр-2 при 48-часовой экспозиции. В среду культивирования вносили следующие дозы: ДДТ — 2000, 200, 20 и 2 мг/мл; ПХБ — 318, 31,8 и 3,18 мкг/мл. Концентрации 20 мг/мл ДДТ и 3,18 мкг/мл ПХБ приняты нами за пороговые, как не влияющие на состояние монослоя и минимально снижающие пролиферацию клеток. Оценку влияния ДДТ и ПХБ на митотический режим клеток НЕр-2 проводили при раздельном и комбинированном внесении препаратов в среду культивирования. Сроки экспозиции — 24, 48, 72 и 96 часов. Вносимые дозы препаратов: ДДТ — 0,009 мг/мл; ПХБ — 0,249 мкг/мл и их комбинация. Результаты оценки индекса митотической активности (ИМА) показали следующее. Через 48 часов экспозиции наибольшую митотическую активность показывали клетки, экспонированные ПХБ (ИМА=0,041), которая в последующие сроки незначительно снижалась и на 4 сутки воздействия достигала контрольного уровня (ИМА96 ПХБ=0,036 при ИМА96 в контроле = 0,037 %о). Митотическая активность клеток, экспонированных ДДТ, во все сроки экспозиции оставалась в пределах 0,027 — 0,029 %о. Самым низким ИМА был в культуре клеток, обработанных смесью ДДТ и ПХБ, и составил: ИМА48 = 0,023, ИМА72 = 0,028, ИМА96 = 0,025 %о. Таким образом, оценка комбинированного действия ДДТ и ПХБ на рост культуры клеток Нер-2 показала, что наибольший подавляющий эффект на пролиферативные процессы в культуре проявляла комбинация подпороговых доз препаратов через 72 и 96 часов экспозиции.